Экстрагирование высушенного порошка из печеней с помощью растворителей жиров и использование остатка, свободного от липоидов, оказалось более обнадеживающим.
Растворимые в воде вещества из сухих печеней так связаны с липоидным комплексом, что они очень мало растворимы в воде; но при удалении липоидов они хорошо переходят в раствор. В дальнейшем авторы применили основательное экстрагирование сухого порошка в сокслеттовском аппарате эфиром, абсолютным алкоголем, либо смесью того и другого.
Затем свободные от липоидов остатки экстрагировались жидкостью Кока. В качестве антигена использовался верхний прозрачный слой жидкости. При этом достигались следующие преимущества: 1) протеины и реагирующие вещества быстрее переходили в раствор, так что за 20 минут могли быть приготовлены однотипные антигены; 2) реакции с сыворотками шистозомных пациентов были резче (из 20 сывороток все положительные — 18 + + + и 2 ++), хотя некоторые сыворотки сифилитиков также давали умеренно или слабо Положительную реакцию; 3) не наблюдалось спонтанного помутнения.
Далее авторы установили, что личинки шистозом могут быть изолированы от тканей печени центрифугированием, так что экстракт не давал положительной реакции с сыворотками, иммунными к печеночной ткани моллюсков. Водные растворы из концентрированных таким образом личинок являлись активными антигенами и не давали ложноположительных реакций с сыворотками сифилитиков.